Products

LecA (PA-IL) is in cytotoxyske lektin en adhesin produsearre troch Pseudomonas aeruginosa dy't hydrofobe galaktosiden bynt mei hege spesifisiteit en affiniteit.Troch it brûken fan in lecA-egfp-oersettingsfúzje en immunoblot-analyse fan 'e biofilm ekstrazellulêre matrix, litte wy sjen dat lecA útdrukt wurdt yn biofilm-groeide sellen.Yn statyske biofilm-assays op sawol polystyrene as roestfrij stiel, waard biofilmdjipte en oerflakdekking fermindere troch mutaasje fan lecA en fersterke yn 'e LecA-overprodusearjende stam PAO-P47.Biofilm oerflak dekking troch de âlder stam, PAO-P47 mar net de lecA mutant op stielen coupons waard ek ynhibeare troch groei yn 'e oanwêzigens fan of isopropyl-beta-D-thiogalactoside (IPTG) of p-nitrophenyl-alpha-D-galactoside ( NPG).Fierder koene folwoeksen wyldtype biofilms foarme yn it ûntbrekken fan dizze hydrofobe galaktosiden wurde ferspraat troch de tafoeging fan IPTG.Yn tsjinstelling ta tafoeging fan p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) dy't in hege affiniteit hat foar de P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n hie gjin effekt op biofilmfoarming of fersprieding.Planktonyske groei fan P. aeruginosa PAO1 waard net beynfloede troch de oanwêzigens fan IPTG, NPG of NPF, noch wie de stam by steat om dizze sûkers as koalstofboarnen te brûken, wat suggerearret dat de waarnommen effekten op biofilmfoarming wiene troch de kompetitive ynhibysje fan LecA-ligand binend.Soartgelikense resultaten waarden ek krigen foar biofilms groeid ûnder dynamyske stream betingsten op stielen coupons, wat suggerearret dat LecA draacht by oan P. aeruginosa biofilm arsjitektuer ûnder ferskillende omjouwingsomstannichheden.

In alfa-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) dy't de t-fucosyl-residu frijlitte kin fan 'e sydketen fan xyloglucan-oligosaccharides is ûntdutsen yn' e blêden fan Arabidopsis-planten.Boppedat, in alfa-L-fucosidase mei ferlykbere substraat spesifisiteit waard suvere út koal (Brassica oleracea) blêden te render in inkele band op SDS-PAGE.Twa peptide-sekwinsjes waarden krigen fan dizze proteïneband, en se waarden brûkt om in Arabidopsis-gen te identifisearjen dat kodearret foar in alfa-fucosidase dy't wy foarstelle om AtFXG1 te neamen.Dêrnjonken is ek in Arabidopsis-gen fûn mei homology mei bekende alfa-L-fucosidases, en wy stelden foar om it as AtFUC1 te neamen.Sawol AtFXG1 as ATFUC1 waarden heterolooch útdrukt yn Pichia pastoris-sellen en de alfa-L-fucosidase-aktiviteiten sekreteare oan it kultuermedium.De alpha-L-fucosidase kodearre troch AtFXG1 wie aktyf tsjin de oligosaccharides fan xyloglucan XXFG en ek tsjin 2'-fucosyl-lactitol mar net tsjin p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside.De AtFUC1 heterolooch útdrukt wie lykwols allinich aktyf tsjin 2'-fucosyl-lactitol.Sa moat de eardere relatearre wurde oan xyloglucan-metabolisme.