Products

Monogalactopyranosides fan fluorescein en fluorescein methylester: synteze, enzymatyske hydrolyse troch biotnylearre β-galactosidase, en bepaling fan translaasjediffusjonskoëffisjint

Fluorescein monoglycosiden (d-galactopyranoside (FMG) en d-glucopyranoside) en harren methyl ester (MFMG) binne taret út acetobromoglucose / galactose en fluorescein methyl ester yn goede opbringsten.Enzymatyske hydrolyse-eksperiminten (mei biotinylearre β-galactosidase) fan 'e galacto-derivaten binne útfierd en kinetyske parameters waarden berekkene.In 15-20 kear ferheging fan 'e fluoreszinsje-yntensiteit is waarnommen tidens de hydrolyse.In lineêre ferheging fan fluoreszinsje is opmurken yn koarte tiid en lege konsintraasje fan substraat, wêrtroch dizze ferbiningen brûkber en gefoelige probes foar galactosidases.De grutte fan 'e Michaelis-Menten konstante (Km) wearde foar MFMG is heger as dy fan FMG suggerearret in mooglike konformaasje feroaring fan it fluorogenic substraat.Km-wearde foar biotinylearre β-Gal mei FMG is leger as dy foar it native enzyme.Dizze observaasje jout hegere substraataffiniteit fan it biotinylearre enzyme yn ferliking mei it lânseigen enzym.Translational diffusion coefficients binne mjitten, foar sawol fluorogenic substraten en sawol de produkten, mei help fan fluorescence correlation spectroscopy.Translational diffusion coefficients foar fluorogenic substraten en de enzymatyske hydrolyse produkten binne mjitten te wêzen ferlykber, yn it berik fan 3.5-4.5 × 10-10 m2 s-1.Sa is in ferbettering of retardaasje fan 'e enzymatyske kinetika troch ferskil yn translaasjemobiliteit fan substraat en produkt net sa sichtber.