Products

Proteinfosforylaasje regelet ferskate sellulêre funksjes en spilet in wichtige rol yn 'e iere ûntwikkeling fan planten.Om eardere ûndersiken fan proteïnefosforylaasje yn Arabidopsis-seedlings oan te foljen en út te wreidzjen brûkten wy in alternative oanpak dy't proteïne-ekstraksje kombineart ûnder net-denaturearjende omstannichheden mei ymmobilisearre metaal-ion-affiniteitskromatografy (IMAC) ferriking fan yntakte phosphoproteins yn Rubisco-depleted ekstrakten, folge troch identifikaasje. mei help fan twadimensjonale gelelektroforese (2-DE) en floeistofchromatografy-tandem massaspektrometrie (LC-MS / MS).Yn-gel trypsine digestion en analyze fan selektearre gel spots identifisearre 144 phosphorylated peptiden en residuen, wêrfan mar 18 phosphopeptides en 8 phosphosites waarden fûn yn de PhosPhAt 4.0 en P3DB Arabidopsis thaliana phosphorylation site databases.Mear as de helte fan 'e 82 identifisearre phosphoproteins wiene belutsen by koalhydraatmetabolisme, fotosynteze / respiraasje of oksidative stress-antwurdmeganisme sms.Ferriking fan yntakte phosphoproteins foarôfgeand oan 2-DE en LC-MS / MS liket deteksje fan phosphorylearre threonine en tyrosine-residuen te ferbetterjen yn ferliking mei metoaden dy't peptide-nivo-ferriking brûke, wat suggerearret dat de twa oanpak wat komplemintêr binne yn termen fan dekking fan fosforylaasjeside.Fergelykjen fan resultaten foar jonge seedlings mei dy earder krigen foar folwoeksen Arabidopsis-blêden identifisearre fiif aaiwiten dy't differinsjaal fosforylearre binne yn dizze weefsels, wat it potensjeel fan dizze technyk oantoand foar it ûndersykjen fan de dynamyk fan proteinfosforylaasje tidens plantûntwikkeling.