Products

Fergelykber mei oare posityf-string RNA-firussen, wurde tombusfirussen replikearre troch it membraan-bûn virale replikasekompleks (VRC).De VRC bestiet út it p92-firus-kodearre RNA-ôfhinklike RNA-polymerase (RdRp), de virale p33 RNA-chaperone, en ferskate koöpteare hostproteinen.Om in funksjonele RdRp te wurden nei syn oersetting, moat it p92-replikaasjeprotein yn 'e VRC wurde opnommen, folge troch syn aktivearring.Wy hawwe earder sjen litten yn in selfrije gistekstrakt-basearre assay dat de aktivearring fan it Tomato bushy stuntfirus (TBSV) RdRp in oplosbare hostfaktor(en) fereasket.Yn dit artikel identifisearje wy it sellulêre waarmte-skokprotein 70 (Hsp70) as de koöptearre hostfaktor dy't nedich is foar de aktivearring fan in N-terminaal ôfkoarte rekombinante TBSV RdRp.Dêrnjonken remt blokkearjen fan Hsp70-funksje op lytse molekulen RNA-synteze troch it tombusvirus RdRp in vitro.Fierder litte wy sjen dat neutrale fosfolipiden, nammentlik fosfatidylethanolamine (PE) en fosfatidylcholine (PC), RdRp-aktivearring yn vitro ferbetterje.Yn tsjinstelling toant fosfatidylglycerol (PG) in sterk en dominant remmende effekt op in vitro RdRp-aktivearring.Wy demonstrearje ek dat PE en PC RdRp-virale plus-string RNA [(+) RNA] ynteraksje stimulearje, wylst PG de bining fan 'e virale RNA oan' e RdRp ynhibeart.Op grûn fan 'e stimulearjende fersus remmende rollen fan ferskate fosfolipiden yn tombusvirus RdRp-aktivearring, stelle wy foar dat de lipide-gearstalling fan rjochte subcellulêre membranen kin wurde brûkt troch tombusviruses om nije VRC-assemblage te regulearjen yn' e rin fan 'e ynfeksje. (RdRp), dy't ferantwurdlik is foar it synthesisearjen fan 'e virale RNA-namme yn ynfekteare sellen fan ferskate positive-string RNA-firussen, is ynearsten ynaktyf.Dizze strategy is wierskynlik om virale RNA-synteze yn 'e cytosol te foarkommen dy't rap liede soe ta induksje fan RNA-triggered sellulêre antivirale antwurden.Tidens de gearstalling fan it membraan-bûne replikasekompleks wurdt de virale RdRp aktivearre troch in ûnfolslein begrepen proses dat de RdRp makket foar RNA-synteze.Troch TBSV RdRp te brûken litte wy sjen dat de koöpteare sellulêre Hsp70-chaperone en neutrale fosfolipiden RdRp-aktivearring in vitro fasilitearje.Yn tsjinstelling, fosfatidylglycerol (PG) hat in dominante remmende effekt op in vitro RdRp-aktivearring en RdRp-virale RNA-ynteraksje, wat suggerearret dat it membranous mikrodomein om it RdRp hinne in protte ynfloed hat op syn fermogen foar RNA-synteze.Sa is de aktivearring fan 'e virale RdRp wierskynlik ôfhinklik fan meardere hostkomponinten yn ynfekteare sellen.