Products

De membraantopology fan it colicin E1-kanaaldomein waard studearre troch fluorescence resonance energy transfer (FRET).De FRET belutsen in genetysk kodearre fluorescent aminosoer (cumarin) as de donor en in selektyf markearre cysteine-residu ferbûn mei DABMI (4-(dimethylamino)phenylazophenyl-4'-maleimide) as de FRET-akseptor.It fluorescent kumarinresidu waard opnommen yn it proteïne fia in ortogonaal tRNA / aminoacyl-tRNA synthetase-pear dat selektive yntegraasje yn elke side binnen it colicin-kanaaldomein koe.Elke fariant hie in stop (TAG) mutaasje foar cumarin ynkorporaasje en in cysteine ​​(TGT) mutaasje foar DABMI taheaksel.Seis interhelyske ôfstannen binnen helices 1-6 waarden bepaald mei FRET-analyse foar sawol de oplosbere as membraan-bûne steaten.De FRET-gegevens lieten grutte feroaringen sjen yn 'e interhelyske ôfstannen tusken helices 3-6 by membraanferiening dy't nij ynsjoch levere yn' e membraan-bûne struktuer fan it kanaaldomein.Yn 't algemien fermindere de kumarin-DABMI FRET-interhelyske effisjinsjes by membraanbinding, boud op it paraplumodel foar it kolisinekanaal.In tentative model foar de sletten steat fan it kanaaldomein waard ûntwikkele op basis fan aktuele en earder publisearre FRET-gegevens.It model suggerearret sirkulêre arranzjeminten fan helices 1-7 yn 'e rjochting fan' e klok fan 'e ekstrazellulêre kant en membraan-ynterfaciale assosjaasje fan helices 1, 6, 7 en 10 om' e sintrale transmembrane haarspeld foarme troch helices 8 en 9.