Products

Oxidative skea oan DNA-basen resultearret gewoanlik yn 'e formaasje fan oksidearre purines, benammen 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) en 7,8-dihydro-8-oxoadenine (8-oxoA), de eardere is in goed- bekend mutagenic lesion.Om't 8-oxoG maklik ûnderwurpen is oan fierdere oksidaasje yn ferliking mei normale basen, waard it ynfoegje fan in basis by DNA-synteze tsjinoer in oksidearre foarm fan 8-oxoG yn vitro ûndersocht.In syntetyske sjabloan mei in inkele 8-oxoG-lesion waard earst behannele mei ferskate ien-elektronoksidanten as ûnder singlet soerstofbetingsten en dêrnei ûnderwurpen oan primer-útwreiding katalysearre troch Klenow-fragmint exo- (Kf exo-), kealthymus DNA-polymerase alfa (pol alfa) ) of minsklik DNA polymerase beta (pol beta).Yn oerienstimming mei eardere rapporten wurde dAMP en dCMP selektyf ynfoege tsjinoer 8-oxoG mei alle trije DNA-polymerasen.Ynteressant waard oksidaasje fan 8-oxoG fûn om dAMP- en dGMP-ynfoegje tsjinoer de lesion te stimulearjen troch Kf exo- mei transiente ynhibysje fan primer-útwreiding op it plak fan 'e wizige basis.Fierder foarmet de lesion in blok by DNA-synteze troch pol alfa en pol beta.Eksperiminten mei in 8-oxoA-modifisearre sjabloanoligonucleotide litte sjen dat sawol 8-oxoA as in oksidearre foarm fan 8-oxoA direkte ynfoegje fan dTMP troch Kf exo-.Massaspektrometryske analyze fan 8-oxoG-befette oligonukleotiden foar en nei oksidaasje mei IrCl62-binne konsistint mei oksidaasje fan primêr de 8-oxoG-side, wat resulteart yn de formaasje fan in guanidinohydantoin-groep as it haadprodukt.Gjin bewiis foar de formaasje fan abasyske siden waard krigen.Dizze resultaten litte sjen dat in oksidearre foarm fan 8-oxoG, mooglik guanidinohydantoin, ferkeard lêzen en ferkeard ynfoegje fan dNTP's by DNA-synteze kin rjochtsje.As sa'n proses yn vivo barde, soe it in punt mutagene lijen fertsjintwurdigje dy't liedt ta G-->T- en G-->C-transversions.De oerienkommende oksidearre foarm fan 8-oxoA toant lykwols primêr korrekte ynfoegje fan T by DNA-synteze mei Kf exo-.