Products

De manier wêrop effekten fan simultane mutaasjes kombinearje om enzymatyske aktiviteit te feroarjen is net maklik foar tefoaren, om't dizze effekten net altyd op in lineêre manier additief binne.Hjirtroch kin de karakterisearring fan 'e effekten fan simultane mutaasjes fan aminosoerresten dy't it substraat bine in wichtige bydrage leverje oan it begryp fan' e substraatspesifisiteit fan enzymen.Yn 'e beta-glycosidase fan Spodoptera frugiperda (Sfbetagly) ynteraksje beide residuen Q39 en E451 mei it substraat en dit is essensjeel foar it definiearjen fan substraatspesifisiteit.Dûbele mutanten fan Sfbetagly (A451E39, S451E39 en S451N39) waarden taret troch site-rjochte mutagenese, útdrukt yn baktearjes en suvere mei affiniteitskromatografy.Dizze enzymen waarden karakterisearre mei p-nitrophenyl beta-galactoside en p-nitrophenyl beta-fucoside as substraten.De k cat/Km-ferhâlding foar inkele en dûbele mutanten fan Sfbetagly mei site-rjochte mutaasjes op posysjes Q39 en E451 waard brûkt om oan te toanen dat it effekt op 'e frije enerzjy fan ESdouble dolk (enzyme-oergong state kompleks) fan' e dûbele mutaasjes (Gdouble) daggerxy) is net de som fan 'e effekten dy't fuortkomme út' e inkele mutaasjes (Gdouble daggerx en Gdouble daggery).Dit ferskil yn Gdouble dolk jout oan dat de effekten fan 'e inkele mutaasjes foar in part oerlappe.Hjirtroch telt dit mienskiplike effekt mar ien kear yn Gdouble daggerxy.Kristallografyske gegevens oer beta-glycosidases litte de oanwêzigens fan in bidentate wetterstofbân sjen mei residuen Q39 en E451 en deselde hydroxylgroep fan it substraat.Dêrom suggerearje sawol thermodynamyske as kristallografyske gegevens dat resten Q39 en E451 in wjersidige ynfloed útoefenje op har respektive ynteraksjes mei it substraat.